抗病毒合剂的抗炎作用研究,中草药防治大菱鲆

【合剂】

中国水产门户网报道 大菱鲆适应低水温环境,抗逆性强,肉质鲜美,而且生长速度快。自引入我国10年来,在北方沿海地区已迅速发展成为一项特色产业,产生了很好的经济效益和社会效益。但是伴随着养殖范围的扩大和养殖密度的增加,以及品种的退化,大菱鲆的病害问题日趋严重。特别是由盾纤毛虫引起的病害最为严重,盾纤毛虫传染力强,危害性强,一旦发生就会给大菱鲆养殖业造成巨大损失。目前国内报道中治疗盾纤毛虫类病害的有效方法不多,在实际生产中,胡乱用药,用禁药的现象很普遍。因此如何筛选高效、低毒、低残留的无公害药物防治此病迫在眉睫。本文就中草药对盾纤毛虫的治疗效果作了初步研究,供广大养殖户参考。 1材料与方法 1.1材料 实验用鱼为眼球白浊、头部发黑的大菱鲆鱼,经鳃部镜检确诊为感染盾纤毛虫,此虫经染色后在显微镜下观察略显黑色。 1.2药物 自中药店采购苦参、大黄、百部、贯众、柴胡、五倍子,单独粉碎成末,以18:12:20:15:10:15的比例混合。 1.3实验方法 实验分三组。每组随机取病鱼10尾。放入100L玻璃缸中,连续充氧曝气,每组浸浴浓度为10mg/L、15mg/L、20mg/L。记录实验开始时间,并随时观察鱼的反应。准备干净无划痕的凹玻片,用剪刀剪取鳃丝置于其上,在光学显微镜下观察虫体变化情况。 2结果 2.1肉眼观察到的现象 大菱鲆鱼在10mg/L的中草药合剂中浸泡后,盾纤毛虫的杀灭效果并不明显。经12小时后,虫体游动仍活泼;在15mg/L的中草药合剂中浸泡,1小时后,可见部分虫体从鳃丝脱落,死亡。2小时后,先头部发黑,后逐渐变白,鳃丝上已见不到盾纤毛虫。浸浴的鱼在10天内未出现任何异常现象;在20mg/L的中草药合剂浸泡,半小时后,部分鱼开始上窜,呼吸频率加快;两小时后,两尾鱼死亡,镜检鳃丝充血,盾纤毛虫体死亡。 2.2显微镜下虫体的变化 在凹玻片上滴洒10mg/L、15mg/L、20mg/L的药液,自感染盾纤毛虫的大菱鲆鱼体上分离到盾纤毛虫虫体,用吸管将虫体吸于凹玻片上,显微镜下观察虫体的变化。浓度为10mg/L的药液对盾纤毛虫的作用较弱,6小时后,未发现死亡虫体,活力不减弱。在浓度为15mg/L的药液中的虫体,15分钟后颜色变浅,并挤成一团,纤毛摆动速度加快。30分钟后,纤毛停止摆动,显微结构模糊。1小时后,虫体结构完全被破坏,胞质流出,凝固。在浓度为20mg/L的药液中的虫体,5分钟后虫体结构即完全被破坏,胞质流出,凝固。 3讨论 3.1通过实验,采用15mg/L的中草药合剂浸泡,可有效杀灭盾纤毛虫而不对大菱鲆产生毒害。20mg/L的中草药合剂虽然可杀灭盾纤毛虫,但对大菱鲆有毒害。 3.2在鱼病防治上,传统杀虫药物如甲醛、硫酸铜等经反复试验,对盾纤毛虫防治效果不佳。但应用中草药,不仅低毒、安全,不易产生耐药性,而且成本低、效果好。 3.3大菱鲆背面表皮较厚,皮肤坚韧有弹性,表面分布少量角质化鳞,不同于牙鲆,所以盾纤毛虫虫体很难通过体表侵入鱼体,只能通过腮部和较软的头部,这就为及时发现病情增加了难度。在实际生产中,定期投喂添加中草药合剂的饲料,可有效防止盾纤毛虫在大菱鲆的寄生感染。编辑:王宇

抗病毒合剂由具有抗病毒、清热、滋阴凉血等作用的中草药经水煎醇沉、浓缩制备而成,以 小鼠为试验动物模型,选择不同剂量研究了该合剂的抗炎作 用。结果:0.5 ml和0.8 ml剂量对小鼠腹腔毛细血管通透性、小鼠皮肤毛细血管通透性、 二甲苯所致小鼠耳壳肿胀及小鼠棉球肉芽肿均有极显着的抑制作用,0.3 ml剂量对前三个试验小鼠也有显着的抑制作用。结论:该合剂有很强的抗炎作用,而且与剂量呈正相关性。?

用中草药合剂催肥猪成本低廉、使用方便,效果较好。 首乌合剂猪出栏前1个月,取首乌、贯众、枳壳等1份,其研末,每50千克猪体重用18~20克,... 用中草药合剂催肥猪成本低廉、使用方便,效果较好。 首乌合剂猪出栏前1个月,取首乌、贯众、枳壳等1份,其研末,每50千克猪体重用18~20克,每天早饲时喂给,连喂14天,间隔两天再喂14天。 贯苍合剂适用于体重30千克以上的猪,取贯众、苍术、枳壳、陈皮、桑白皮、苏子各100克,晒干粉碎,拌入1千克盐和1.5千克酒曲,体重30~60千克的猪每天喂50克,60千克以上的猪每天喂60克,在晚饲时拌饲料喂给即可。

是两种或两种以上的中草药经水煎,浓缩成一定容量,或中草药的提取物以水为溶剂配制而成的液体制剂。必要时可加入适当的防腐剂,供内服(合剂不应有发霉、发酵等现象,允许有少量沉淀,但振荡后,沉淀应能均匀分散,不能有结块)。

关键词:抗病毒合剂;抗炎作用;小白鼠?

中草药抗病毒合剂是在中兽医学卫气营血辨证理论指导下,筛选 出具有清热、解毒、滋阴等作用的中草药组方而成。为了进一步证实其抗炎作用,笔者等对 此进行了药效学试验,为临床用药提供理论依据。?

1材料

1.1 药物和试剂〖HT5”SS〗?抗病毒合剂由石膏、知母、紫花地丁、金银花、玄参、生地、麦冬、连翘、龙胆草、板蓝根 、鱼腥草、穿心莲、大青叶、赤芍、蟾酥十五味中草药组成,于2002年3月6日购自陕西省扶 风县中药采购供应站。伊文思蓝,上海化学试剂采购供应站,批号:821102;无水乙醇,开 封化学试剂总厂,批号:991111;二甲苯,天津市恒昊公司化学试剂厂,批号:990116;丙 酮,西安化学试剂厂,批号:880525;冰乙酸,开封化工四厂,批号:830913;甲酚皂溶液 ,国营南昌北垦化工试剂厂,批号:990605。

1.2 试验动物 ?昆明种小白鼠,18~22 g,160只,雌雄各半,由第四军医大学实验动物中心提供。?

2 方法与结果

2.1 抗病毒合剂的制备 用电子天平精确称取上述中草药的前十四味,蒸馏水浸泡2 h后,煎煮15 min,共煎两次。 合并煎液,浓缩,加入乙醇使醇含量达65%,静置24 h,过滤,回收乙醇。再将一定量蟾酥 研为细末加入药液中,灭菌,后置 4℃冰箱保存备用。?

2.2 抗病毒合剂对腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透 性增高的影响小鼠40只, 雌雄各半, 分为4组。 第1组为对照组, 每只灌服 生理盐水0.5 ml; 第2组、 第3组、 第4组分别按0.3 ml/只、 0.5 ml/只、 0.8 ml/ 只灌服抗病毒合剂,1次/d。于第4天给药1 h后各鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水0.3 ml/只,随即于腹腔注射0?6%醋酸0?2 ml/只,致炎20 min,脱 臼处死 小鼠,打开腹腔,用生理盐水6 ml分数次洗涤腹腔,吸出洗涤液,合并后加生理盐水至10 m l,3 000 r/min,离心15 min,用721分光光度计于590 nm处比色测定光密度值,并记录结 果。结果见表1。

表1结果表明,0.3 ml剂量对小鼠腹腔毛细血管通透性有显着抑制作用,0. 5 ml和0.8ml对小鼠腹腔毛细血管通透性有极显着的抑制作用,而且0.8 ml与0.3 ml、0.5 ml相比有极显着的抑制作用。 2.3 抗病毒合剂对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性的影响 40只小鼠,雌雄各半,随机分为4组,给药途径及剂量同2.2。第4天给药1 h后尾静脉注射0 .5%伊文思蓝生理盐水溶液0.3 ml/只,随即于每只小鼠背部皮内注射二甲苯0.03 ml致炎 ,20 min后脱臼处死小鼠,背部剪毛,将蓝染的皮肤剪下、切碎,放入6 ml丙酮生理盐水中 浸泡48 h,2 000 r/min,离心10 min,取上清液用721分光光度计测定光密 度值并记录结果。结果见表2。表2结果表明,0.3 ml剂量组对小鼠皮肤毛细血管通透性有显着的抑制作用,0 .5 ml和0.8 ml剂量组对小鼠皮肤毛细血管通透性有极显着的抑制作用,而且各剂量组之 间有明显差异,呈正相关性。?2.4 抗病毒合剂对二甲苯所致小鼠耳壳炎症的影响? 小鼠40只,雌雄各半,随机分组,给药途径及剂量同2?2。第4天给药1 h后左耳壳滴二甲苯 0 02 ml/只,30 min脱臼处死,用剪刀沿小鼠的耳廓基线剪下两耳,在同一部位用0?6 cm 的穿孔器冲下耳片,两耳片称重求差,结果见表3。?

表3结果表明,0.3 ml剂量对小鼠耳壳炎症无显着抑制作用;0.5 ml和0.8 ml剂量对小鼠 耳壳炎症有极显着的抑制作用,而且0.5 ml和0.8 ml与0.3 ml剂量组相比有极显着的差异。?

2.5 抗病毒合剂对小鼠棉球肉芽肿的影响? 小鼠40只,雌雄各半,随机分组,各鼠用乙醚麻醉,背部剪毛消毒,切一长0?5 cm的切口 ,从切口向两侧腋下各植入一个5 mg的灭菌棉球,缝合切口。从手术当日起连续给药7 d, 第8天脱臼处死小鼠,切开背部皮肤,将棉球连同周围的肉芽组织一起取出,剔除脂肪组织 ,置于60 ℃干燥箱烘干,精确称取重量并记录结果,致炎棉球重量减去棉球重量求差,结果见表4。?

表4结果表明,0 3 ml剂量组对小鼠棉球肉芽肿有显着的抑制作用;0 5 ml和0 8 ml对小鼠棉球肉芽肿有极显着的抑制作用,而且0?8 ml比其它剂量组有明显的抑制作用。?

3 讨论 抗病毒合剂是在中兽医学卫气营血辨证理论方法指导下,筛选具有解热、抗炎、抗病毒、滋 阴 等作用的组方而成。方中生地、穿心莲、赤芍、金银花、连翘、蟾酥等药对动物炎症模型都 具有显着的抗炎作用。本研究应用了四种实验性炎症模型,包括三方面内容 :一是毛 细血管通透性的测定,包括皮内染料渗出与腹腔染料渗出法;二是炎性肿胀的测定;三是肉芽肿模型。通过以上药效学试验,结果证明中草药抗病毒合剂具有极显着的抗 炎作用,而且与剂量呈正相关性,此为临床应用提供了充分的用药依据。

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